建议使用适当的染色剂对通常无菌部位的所有组织和液体进行直接显微镜检查，应考虑使用光学增白剂（如钙荧光白）进行快速直接显微镜检查。

对于脑脊液中隐球菌性脑膜炎的诊断，抗原检测可以代替墨汁染色显微镜检查。

在检查患者是否存在侵袭性真菌感染时，建议从非无菌部位（如支气管肺泡灌洗液[BALF]）直接镜检。

在到达实验室后2-4小时内，应对通常无菌部位的样本进行真菌直接显微镜检查。

真菌学特异性，标准化的操作程序推荐用于真菌的培养。

为了提高血液培养中真菌培养的敏感性，至少应获得60 ml 血液（成人）。

所有存在真菌感染风险的患者均应进行呼吸样本大容量培养（>100 μL）。

所有从无菌部位分离的真菌（酵母菌和霉菌）和从肺部分离的霉菌都应鉴定到物种水平，如果怀疑隐球菌感染，还应从呼吸道样本中鉴定酵母菌。

从感染高危（重症监护或免疫功能低下）患者的尿液标本中培养的酵母菌应鉴定到属或种水平。

真菌培养应按属和种（常见酵母菌）或种或复杂名称（罕见酵母菌和霉菌）报告。

来自正常无菌部位或表现出独特抗性的酵母菌应储存3个月。

霉菌培养应保存至完全鉴定和抗真菌敏感性测试（如适用）完成或3-6个月，怀疑暴发感染时，建议将酵母菌或霉菌分离株至少保存3个月。

对于所有怀疑是严重、深层或致命性侵袭性感染原因的真菌分离株，应常规进行抗真菌药敏试验。

如果为难治性或突破性真菌感染，也应进行药敏试验。

如果正在进行抗真菌治疗，建议进行物种水平的鉴定，然后进行药敏试验。

对感染高危患者群体的所有脑脊液标本进行隐球菌抗原检测。

当怀疑侵袭性曲霉病时，特别是在重症监护患者和免疫功能低下患者中，应进行血清半乳甘露聚糖检测；需要在新的危险人群中监测活性半乳甘露聚糖（例如，流感、COVID-19或间质性肺疾病患者），因为侵袭性曲霉病的临床和放射学无明显特征；虽然无中性粒细胞减少症患者血清半乳甘露聚糖的敏感性可能降低，但特异性仍然很好。

BALF半乳甘露聚糖检测应在与血清相同的组中，以及在患有复杂呼吸系统疾病且诊断不明确的患者中进行检测。

怀疑侵袭性念珠菌病或肺孢子菌肺炎的患者应进行血清1,3-β-d-葡聚糖（BDG）检测，可能对支持侵袭性曲霉病的诊断有价值，血清BDG检测对肺孢子菌肺炎的诊断具有良好的敏感性，BDG阴性预测值通常足以排除侵袭性酵母菌和肺孢子菌，但阳性应结合额外的真菌学检测。

所有新诊断为哮喘的患者都应通过真菌特异性 IgE 检测或包括曲霉菌在内的过敏性皮肤测试来筛查烟曲霉过敏。

存在一个或多个肺空腔的患者应检测曲霉 IgG，曲霉IgG是慢性肺曲霉病的关键检测，在侵袭性曲霉病中可能呈阳性，特别是在无中性粒细胞减少的患者中。

肺孢子菌 PCR 应在所有免疫功能低下的患者的 BALF 中进行，也可能用于（诱导）痰、气管内及上呼吸道标本。疑似肺孢子菌肺炎的幼儿鼻咽 PCR 标本通常是确定诊断的唯一手段。

结合血清 BDG 和肺孢子菌 PCR 对肺孢子菌肺炎的确诊和排除都是有用的。

当怀疑有任何形式的曲霉病时，应对呼吸道（尤其是深部）样本进行曲霉 PCR。侵袭性曲霉病高风险患者（如中性粒细胞减少患者）可考虑与半乳甘露聚糖一起进行血液曲霉PCR检测。曲霉 PCR 阳性结合半乳甘露聚糖阳性通常证实侵袭性曲霉病的诊断，如果两者均为阴性，则排除。

存在侵袭性真菌疾病临床证据的高危患者，特别是在排除了其他原因（如曲霉病）的情况下，应考虑毛霉菌 PCR检测。中性粒细胞减少症和鼻窦炎患者的双重毛霉菌和曲霉菌感染的记录越来越多。BALF 毛霉菌PCR 既能确诊也能排除肺部疾病，而血液和组织的PCR 能确诊，但不一定能排除疾病。

在可能的情况下，应将念珠菌 PCR 与血清 BDG 相结合用于检测侵袭性疾病高风险患者（例如，具有多种危险因素的重症监护病房患者）。

泛真菌 PCR 应用于存在侵袭性真菌感染组织病理学证据的标本，如果 PCR 结果为阳性，则应进行真菌物种形成测序。

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参考来源：Schelenz S, Abdolrasouli A, et al. British Society for Medical Mycology best practice recommendations for the diagnosis of serious fungal diseases: 2025 update. Lancet Infect Dis. 2025 Nov 10:S1473-3099(25)00550-X.