作者：叶孜清 黄瑛

一、VEO-IBD的特征

炎症性肠病(IBD)为遗传易感宿主对共生或致病微生物免疫反应失调所致，表现为胃肠道慢性炎症，可见于任何年龄。IBD包括克罗恩病、溃疡性结肠炎、未分型IBD。其中VEO-IBD发生于6岁以内的患儿，占儿童IBD的4%～10%。VEO-IBD患儿临床表现与成人不同。VEO-IBD患儿发病时症状重，以炎症反应为主，多表现为广泛性结肠病变。VEO-IBD对传统治疗方式，如激素、免疫抑制等反应不佳。VEO-IBD患儿发病年龄早、环境暴露时间有限、具有较强家族史，提示宿主遗传占十分重要的作用。已有证据显示VEO-IBD多由单基因缺陷所致。报道最多者为IL-10基因及IL-10R基因突变导致的VEO-IBD病例，世界范围内共报道57例。

二、IL-10信号通路及其致病机制

IL-10由多种细胞(包括单核细胞、巨噬细胞、树突细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等)释放产生，可抑制促炎细胞因子，如肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-12等。IL-10R由两条a链与两条b链构成。动物实验证实，IL-10或者IL-10R基因敲除小鼠均表现为严重肠道炎症。2009年，Glocker等首次报道2例IL-10RA基因突变及2例IL-10RB基因突变所致VEO-IBD病例，并证实IL-10通路信号传导障碍，致转录激活因子3磷酸化受阻，患儿肠道高免疫炎症反应严重且难治。国内许永彬等首次报道2例IL-10RA基因突变VEO-IBD病例。IL-10、IL-10RA、IL-10RB基因突变均可致VEO-IBD，IL-10信号通路对抑制肠道炎症起重要作用。

三、VEO-IBD的临床表现及实验室特征

1．发病年龄

IL-10或IL-10R基因突变所致VEO-IBD，发病年龄早，多见于婴儿期。Beser等报道的VEO-IBD队列研究，包含患儿15例，其中IL-10R基因突变患儿平均发病年龄为5.0月龄，而非IL-10R基因突变患儿平均发病年龄为14.7月龄。我国报道的4例IL-10R基因突变所致的VEO-IBD病例均为新生儿期起病。

2．消化道表现

VEO-IBD患儿常见症状为腹痛、腹泻、黏液血便。此外，肛周病变也比较常见，以瘘管形成、肛周脓肿为突出表现，Beser等报道肛周病变更多见于IL-10或IL-10R基因突变患儿，其他文献亦有类似报道。Pigneur等报道肛周病变主要可以分为两种类型：(1)广泛持续多发肛裂；(2)肛周脓肿及瘘管形成。Engelhardt等报道患儿出现肠皮肤瘘、直肠阴道瘘。彭凯玥等报道1例IL-10R突变患儿，于生后48 d出现外阴皮肤红肿，左侧臀部肛周脓肿，后破溃形成肛瘘。VEO-IBD患儿肠道病变多累及结肠；而晚发型IBD患儿，则以末端回肠病变为主。Pigneur等总结10例IL-10或IL-10R基因突变所致VEO-IBD患儿内镜表现：所有患儿中均可见严重结肠炎症，表现为浅表及深部溃疡，累及范围为直肠至右半结肠，病变具跳跃性、铺路石样改变。患儿肠镜病理组织学表现以上皮内肉芽肿、黏膜层单核细胞浸润及隐窝脓肿为特点。我国报道的4例IL-10RA基因突变患儿，肠镜均见结肠多发溃疡。

3．全身表现及并发症

VEO-IBD患儿常见全身表现为生长发育迟滞和营养不良，可能与发病年龄早、病情严重难以达到临床缓解、营养摄入量有限等因素有关。肠道炎症持续可致发热、反复感染。而部分常见于晚发型IBD的肠外表现：如关节炎、虹膜炎、葡萄膜炎、皮肤结节性红斑等则较少见于上述患儿。Pigneur等报道10例IL-10或IL-10R基因突变患儿，部分IL-10RB基因突变患儿表现为反复毛囊炎；少数IL-10RA基因突变患儿表现为皮肤湿疹。另外，IL-10或IL-10R基因突变患儿有反复严重感染史，多为呼吸道感染或脓毒血症。共4例患儿并发B细胞淋巴瘤。

4．实验室检查

(1)血液检查：VEO-IBD患儿处于疾病活动期，可见其炎症指标红细胞沉降率(ESR)及C反应蛋白(CRP)增高，白蛋白降低。Pigneur等报道患儿抗肠细胞抗体等自身抗体均阴性，仅有2例患儿表现为抗核抗体弱阳性；刘黎黎等报道除抗核抗体弱阳性外，抗中性粒细胞胞质抗体、抗髓过氧化物酶抗体均阴性。故IL-10或IL-10R基因突变相关VEO-IBD患儿自身抗体阳性率较低，尚未发现特异性自身抗体。(2)粪便检查：粪常规可见明显白细胞升高、伴黏液。并非所有患儿均有粪隐血阳性，部分患儿亦可为阴性，不具特异性；粪培养及乳糖酶检测阴性。

四、遗传学诊断及功能验证

根据Kotlarz等报道，对于疑似IL-10、IL-10R基因缺陷所致VEO-IBD患儿，首先进行基因组测序，确定存在基因缺陷后，进一步行功能验证试验。许永彬等采用反转录PCR扩增先证者及其父母的IL-10R基因组DNA，并对PCR产物进行双向序列测定。IL-10功能验证试验主要通过分离外周血单个核细胞，予脂多糖及IL-10共刺激培养，以Western印迹检测IL-10RA和磷酸化信号转导及转录激活因子3蛋白表达，酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子水平。实验结果表明：患儿和健康对照均可表达IL-10RA，但患儿下游功能明显缺陷，IL-10刺激后下游磷酸化信号转导及转录激活因子3无表达；TNF-α明显高于对照者，证实患儿体内炎症的负反馈调节功能严重受损。

Mao等对患儿基因组DNA进行全外显子组捕获和测序，对于高通量测序结果进行分析、变异注释及筛选得出功能缺失型变异(获得终止密码子的突变、移码突变和关键剪接位点突变)、错义突变、非移码的缺失或插入；利用收录已知或疑似致病突变的数据库，如ClinVar、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)和人类基因突变数据库(HGMD)筛选已知致病突变；同时采用Swiss-PdbViewer等多种工具预测错义突变的功能以及非编码调控序列；利用基于人群的大规模测序数据库，包括千人基因组测序计划、外显子组测序计划、外显子测序数据集合协作组等，排除正常人群中具有较高频率变异。最终在家系样本中进行Sanger测序验证。

五、诊断与鉴别诊断

1．诊断

通常根据"儿童炎症性肠病诊断规范共识意见"及"青少年儿童炎症性肠病诊断指南(波尔图标准)"，可作出IBD的诊断；若患儿发病年龄小于6岁，则可诊断为VEO-IBD。Uhlig等研究表明，对于VEO-IBD患儿，若符合以下特点：发病年龄早、阳性家族史、早期出现肛瘘及肛周脓肿、反复全身感染、对传统治疗无效，需考虑单基因突变所致，完善基因检测，以明确是否存在IL-10或IL-10R等基因突变。

2．鉴别诊断

(1)牛奶蛋白过敏：常见于0～3岁儿童，严重过敏性结肠炎患儿可发生消化道出血，回避牛奶蛋白、换用深度水解蛋白配方或氨基酸配方替代喂养后，症状可缓解，且患儿全身状况一般良好；但食物过敏可能继发于基因突变，需结合其他实验室检查结果综合考虑，必要时可完善肠镜以鉴别诊断。(2)原发性免疫缺陷病：部分原发性免疫缺陷病，如常见变异型免疫缺陷病、Wiskott-Aldrich综合征及Omenn综合征等，可有类IBD肠道炎症改变，故需注意进行鉴别诊断。对VEO-IBD患儿常规需完善免疫球蛋白(IgA、IgE、IgG、IgM)、流式细胞淋巴细胞亚群分析、中性粒细胞功能检查，以鉴别原发性免疫缺陷病。必要时可进行基因检测，以明确诊断。

六、治疗

1．药物治疗

IBD的治疗以激素、5-氨基水杨酸、免疫抑制剂及生物制剂为主，但VEO-IBD对上述传统治疗方式反应不佳。激素作用机制为下调促炎因子，如前列环素、IL-1及IL-6等细胞因子，由于上述患儿存在IL-10通路缺陷，炎症抑制功能缺失，故进行激素治疗效果甚微。Beser等对3例IL-10R基因突变患儿进行激素治疗，无法诱导疾病缓解；使用硫唑嘌呤进行免疫抑制治疗，疗效欠佳；使用TNF拮抗剂治疗，2例患儿实验室检查指标改善，疾病仅暂时缓解，无法长期控制疾病活动。此外，对于该类患儿，初期通常需采用营养支持。彭凯玥等[4]报道对1例IL-10RA基因突变患儿，予抗感染、沙利度胺、美沙拉秦控制肠道炎症反应，结合肠道内外营养支持后，患儿病情稳定。

2．手术治疗

VEO-IBD患儿对于传统药物治疗反应差，同时肠道炎症严重且持续，故选择部分结肠或结肠次全切除、回肠造瘘术以暂时控制疾病发展。Murugan等报道接受手术治疗患儿的平均年龄为24月龄，其中2例接受部分结肠切除术、3例行回肠造瘘术、3例回肠造瘘术后进行部分结肠切除。但VEO-IBD常有全消化道累及，伴全身表现，如反复发热、感染，故上述患儿行手术治疗后，仅暂时控制肠道局部炎症反应。Kotlarz等亦报道，结肠切除或回肠造瘘术并无法使患儿长期临床缓解。此外，患儿因肛周脓肿、直肠阴道瘘而行手术治疗，术后伤口愈合困难、易感染，对患儿造成很大痛苦，同时增加了护理的难度。

3．移植治疗

全球已报道17例接受异基因造血干细胞移植(HSCT)治疗患儿，均取得临床缓解。Glocker等首次报道2例接受HSCT治疗的患儿；Engelhardt等报道3例接受HSCT患儿，其中1例患儿接受HLA匹配同胞妹妹的HSCT，术前予二甲磺酸丁酯、氟达拉滨及兔抗胸腺细胞球蛋白预处理方案。移植2个月后，尽管合并巨细胞病毒感染、铜绿假单胞菌感染，并致脓毒症，但此时患儿排便成形，无需肠外营养支持；1年后患儿宿主嵌合率超过90%，且瘘管愈合、体重增加。另2例患儿分别在3岁11月龄、14月龄时接受HSCT，均为减强预处理方案，移植后临床缓解；随访32、21个月，患儿病情稳定。Yanagi等报道1例患儿于21月龄接受脐带血造血干细胞移植，移植后2个月取得临床缓解。根据Murugan等报道，移植排斥发生率较高，11例接受移植治疗的IL-10或IL-10R基因突变患儿中，3例发生排异。故需使用降低排斥减强预处理，如移植后予环磷酰胺可降低排异与移植物抗宿主病发生率，同时早期进行免疫重建。彭凯玥等报道中国首例脐带血干细胞移植治疗IL-10RA基因突变VEO-IBD病例，患儿接受同性别无关供者HLA基因位点8/10的脐带血行干细胞移植，移植12周后，患儿嵌合体率95.7%，Sanger测序及蛋白功能验证IL-10RA基因突变点被修复，IL-10信号通路轴功能恢复正常。综合已有报道，HSCT可治愈IL-10或IL-10R基因突变所致VEO-IBD，并证实该基因缺陷定位于造血系统。

4．其他治疗策略

关于其他治疗手段：如静脉应用IL-10基本无效且可导致不良反应；转基因乳酸乳球菌可产IL-10，经证实对IL-10基因敲除小鼠模型有显著抗炎作用，但对于IL-10R基因突变患儿则无明显疗效。近期Shouval等研究表明，IL-1β参与IL-10R基因突变所致VEO-IBD；研究者将IL-1β受体阻滞剂阿那白滞素用于2例IL-10R基因突变患儿，治疗4～7周后，患儿临床症状缓解、内镜见黏膜部分愈合。但该药仅用于移植前过渡期治疗，有待进一步研究证实其是否可作为长期用药。

七、预后及随访

已报道的17例接受移植治疗的患儿，均已取得临床缓解。共4例患儿确诊为B细胞淋巴瘤，其中2例行HSCT前死亡；2例患儿经化疗后，情况缓解，后经HSCT治疗后治愈。此外，有2例患儿未行HSCT治疗，其中1例IL-10RA基因突变患儿出生后12周时起病，予沙利度胺及丙种球蛋白治疗后，随访至10岁情况稳定；另1例IL-10RB基因突变患儿，于12周时起病，行回肠造瘘术，未予药物治疗，病情稳定，拟行HSCT。国内报道的4例IL-10RA基因突变患儿，其中1例静脉使用甲泼尼龙治疗后，于6月龄时病情暂稳定后出院，未见后续随访报道；2例IL-10RA基因突变患儿经激素、免疫抑制治疗，效果不佳，于2、8月龄死亡；彭凯玥等报道患儿接受脐带血干细胞移植11个月，临床持续缓解，体重及身长均有明显追赶生长。故提示基因突变位点与临床表现严重程度、转归间可能存在一定联系，且绝大多数IL-10及IL-10R基因突变所致VEO-IBD患儿，若不行移植治疗，总体预后不佳；而HSCT可为其带来治愈可能。

来源：《中华儿科杂志》，2017,55（02）:152-155。

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