NMIBC患者中，约有40%对BCG治疗有效。尽管免疫细胞耗竭与BCG耐药性相关，但早期扩散（即隐匿性肌层浸润性疾病）也可能导致BCG治疗失败。因此，寻找能够早期识别BCG治疗失败风险的生物标志物，成为亟待解决的临床难题。

该研究纳入102例接受BCG治疗的NMIBC患者，中位随访28个月，入组于2024年4月结束。我们采用全基因组测序（WGS）技术，从配对的血沉棕黄层、肿瘤组织或尿液沉淀（UPEL）DNA中，构建每位患者特有的全基因组肿瘤分子标签（Veracyte）。随后，将这些标签用于分析治疗前、治疗期间及治疗后采集的271份尿液和329份血浆样本的游离DNA（cfDNA）测序数据，以检测尿液肿瘤DNA（utDNA）和血液循环肿瘤DNA（ctDNA）。同时，利用Olink免疫肿瘤学试剂盒检测了344份尿液上清液，并对55份肿瘤样本进行了总RNA测序。会议的后续报告将提供更新的随访数据。

BCG治疗前，5例（6%）患者的血浆中检出ctDNA，其中3例后续发生高级别复发或疾病进展。治疗前ctDNA阳性与复发风险升高密切相关（HR=6.88），但与肿瘤分期（p > 0.42）和分级（p = 0.91）均无显著关联。在BCG治疗前、治疗期间和治疗后，utDNA的检出率分别为58%、51%和27%。治疗期间或治疗后utDNA阳性者，其无复发生存期显著缩短。BCG治疗后utDNA可检出的22例患者中，10例（45%）出现复发；而utDNA未检出的49例患者中，仅11例（22%）复发（p = 0.022）。平均而言，utDNA比临床检查（如膀胱镜）提前133天（范围：4–405天）发现复发迹象。

在肿瘤组织有限（如仅原位癌）的情况下，利用尿液沉淀（UPEL）DNA同样可以构建患者特异性模型，并实现ctDNA/utDNA检测。BCG治疗可诱导尿液中免疫肿瘤相关蛋白水平升高。肿瘤相关蛋白（MMP-12、IL6、IL8）在BCG治疗前即已升高；而在高级别复发患者中，治疗早期即有8种免疫调节蛋白（包括HO-1、GZMA、GZMB、LAP TGF-β-1和TRAIL）表达上调，与未复发患者形成明显差异。