尽管生物制剂在IBD的治疗中取得了突破性进展，但其仍无法诱导并维持患者的长期病情缓解及肠道黏膜愈合，难治性IBD的诊疗仍面临巨大挑战。挖掘新的分子靶点，增强临床生物制剂的抗炎疗效是当前IBD研究领域的重要课题。环指蛋白187（RNF187）又称环指结构域AP-1共激活因子1，是环指蛋白家族成员之一，为含环指结构域的泛素E3连接酶，具有自身泛素化降解的特点，具有不稳定性。目前尚未明确RNF187在肠炎中发挥的生物学功能及相关调控机制，其在IBD治疗中的潜在价值也亟待探索。在前期课题组的测序结果中发现，RNF187的表达可能与肠炎的发展密切相关，为明确RNF187在IBD中发挥的功能及作用机制，杜鹏教授团队开展了本研究。

本研究采用体外实验与体内动物实验相结合的研究方式，以Villin-Rnf187^flox/flox小鼠为动物模型，葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导构建小鼠急性肠炎模型，检测RNF187在肠上皮炎症中的生物学功能。通过构建截断体、点突变及Co-IP等方法检测RNF187调控肠上皮炎症的机制及其在炎症条件下的表达调控。构建RNF187重组蛋白，检测其对肠上皮炎症的治疗作用及对生物制剂疗效的影响。

1．体外实验及Villin-Rnf187^flox/flox小鼠肠炎动物实验中发现，敲低RNF187表达可显著增强肠上皮炎症反应，提示RNF187是一种肠道炎症的抑制因子。

2.在下游机制上，研究发现RNF187不通过其E3泛素连接酶，而通过其C端163-265结构域与IKKα/β的亮氨酸拉链竞争性结合，从而抑制了IKK复合物的形成及后续激活，提示RNF187作为IKK结合蛋白，通过不依赖其E3泛素连接酶活性抑制肠上皮炎症反应。

图1. RNF187通过其C端163-235结构域与IKKα/β的LZ结构域竞争性结合，抑制IKK复合物的形成及激活，从而抑制肠上皮炎症

3.在RNF187的上游机制方面，研究发现RNF187在TNF-α刺激下蛋白表达显著降低。进一步机制研究发现，IKKα通过其激酶活性磷酸化RNF187促进其K195和K223处的自身泛素化，从而促进RNF187蛋白降解。

图2. IKKα通过其激酶活性磷酸化RNF187促进其K195和K223处的自身泛素化，从而促进RNF187蛋白降解

4.更重要的是，本研究成功制备出了RNF187重组蛋白，并证实外源性补充该重组蛋白可显著减轻小鼠肠道炎症，并提升IFX的治疗效果。

图3. RNF187重组蛋白联合IFX与单用IFX相比，有着更强的治疗作用，提示RNF187重组蛋白可显著增强IFX的抗炎疗效

5.与上述研究结果一致，在IBD患者的结肠组织中，RNF187的表达水平在肠道炎症状态下呈下调趋势，且该蛋白的表达水平与英夫利昔单抗的治疗效果密切相关。

图4 本研究示意图：RNF187通过其C端163-235结构域与IKKα/β的LZ结构域竞争性结合，抑制IKK复合物的形成及激活，从而抑制肠上皮炎症。在上皮炎症中，IKKα通过其激酶活性磷酸化RNF187促进其K195和K223处的自身泛素化，从而促进RNF187蛋白降解。RNF187重组蛋白可显著治疗肠上皮炎症反应，并增强IFX临床抗炎疗效。

本研究结果表明，RNF187是肠道炎症的重要负调控因子，RNF187通过其C端163-265结构域与IKKα/β的亮氨酸拉链竞争性结合，从而抑制了IKK复合物的形成及后续激活，提示RNF187作为IKK结合蛋白，通过不依赖其E3泛素连接酶活性抑制肠上皮炎症反应。在RNF187的上游机制方面，发现IKKα通过其激酶活性磷酸化RNF187促进其K195和K223处的自身泛素化，从而促进RNF187蛋白降解，使RNF187在炎症中表达降低。进一步构建RNF187重组蛋白，证实其可有效治疗肠上皮炎症，并显著增强IFX抗炎疗效，本研究为IBD的发病机制提供实验基础，尤其为难治性IBD患者提供了新的临床治疗策略。

专家简介

杜鹏 教授

• 上海交通大学医学院附属新华医院副院长，肛肠外科学科带头人，外科博士，主任医师，博士生导师

• 上海市医师协会肛肠专业委员会副会长

• 中华医学会肠外肠内营养学分会胃肠病与营养协作组副组长

• 中国医师协会肛肠医师分会炎症性肠病学组委员兼秘书

• 上海市抗癌协会胃肠肿瘤腹腔镜专委会常委

• 上海市医学会普外科专科分会结直肠肛门外科学组委员

• 美国克里夫兰医学中心访问学者

• 从事结直肠肛门疾病领域临床工作20余年，专业擅长结直肠癌与炎症性肠病外科手术

• 作为负责人近年承担国家自然基金4项，上海市“科技创新行动计划”基金项目3项，医工交叉课题（含重点项目）2项

• 近五年以第一/通讯作者发表论文30余篇，副主编出版专著3部，牵头撰写指南1项，参与制定专家共识3部，担任《中华炎症性肠病》、《JCC中文版》等杂志编委

• 积极牵头组织多学科诊治与临床研究，是结直肠癌与炎症性肠病专业领域开展外科手术与临床研究的知名专家

汇报人简介

许伟民

• 外科学博士，主治医师，上海交通大学医学院附属新华医院结直肠肛门外科

• 主持国自然面上项目、国自然青年项目、上海市自然科学基金、上海市扬帆计划、上海市卫健委临床研究专项、上海交通大学“交大之星”计划医工交叉研究基金等各级项目7项；

• 近5年以第一/通讯作者发表包括Cell Death & Differentiation, Advanced Science, Mucosal Immunology, EBioMedicine, Inflammatory Bowel Disease在内的SCI论著23篇；

• 受邀作ECCO大会口头发言；获AOCC“Best Travel Award”奖、上海交通大学医学院首届 “陈家伦科研创新奖”等荣誉；入选NSFC德国林岛项目，获评“林岛学者”

• 临床专业方向为炎症性肠病及结直肠肿瘤的外科治疗，师从国内知名结直肠外科专家杜鹏教授，在结直肠癌的微创外科治疗、溃疡性结肠炎全结直肠切除回肠储袋肛管吻合术（IPAA）与并发症处理、复杂克罗恩病围手术期管理等方面进行了较为深入研究