【导语】

1. 蛋白质组学联合免疫T细胞杀伤筛选鉴定SOAT1为肝癌免疫逃逸驱动因子

本研究利用液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）对复发及非复发HCC肝移植患者的肿瘤样本进行蛋白质组学分析，共鉴定出86个与复发显著相关的差异表达蛋白（DEPs）。基因本体论（GO）分析显示，这些DEPs在复发性肿瘤中富集于胆固醇代谢、核苷酸切除修复、类固醇激素生物合成及DNA复制等相关通路，提示其可能在复发中发挥潜在作用。为进一步探究其作用机制，研究者在Hepa1-6细胞中进行候选基因敲除并与OT-I CD8⁺ T细胞共同培养，研究结果显示，SOAT1缺失的细胞对T细胞杀伤最为敏感。此外，在免疫健全的小鼠模型中，缺失SOAT1可显著抑制肿瘤生长，提示SOAT1是肝癌免疫逃逸的关键驱动因子（图2）。

研究者进一步探究了SOAT1与HCC临床特征的相关性，结果显示，与癌旁组织相比，HCC组织中的SOAT1表达量显著升高；在复发HCC患者的原发肿瘤组织中SOAT1表达量也显著高于非复发患者。生存分析显示，肿瘤内高SOAT1水平与复发率更高、总生存期（OS）更短相关；此外，在接受ICIs治疗的42例HCC患者中，SOAT1高表达患者发生疾病进展比例也更高。上述结果提示，高SOAT1表达与HCC不良预后以及对免疫治疗疗效更差相关（图2）。

图2 蛋白质组学联合免疫T细胞杀伤实验，鉴定出SOAT1是肝癌免疫逃逸驱动因子^[1]

2. SOAT1缺失可重塑肿瘤免疫微环境，破坏胆固醇与脂质代谢，削弱肿瘤抗氧化能力

在皮下及原位肿瘤模型系中，SOAT1缺失后肿瘤生长明显受到抑制；在人肝癌细胞系中，SOAT1缺失显著增强了磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3） CAR-T细胞的杀伤效果。免疫微环境分析显示，在磷酸盐缓冲液（PBS）和抗PD-1药物处理条件下，缺失SOAT1的肿瘤细胞中CD8⁺ T细胞、PD-1⁺ CD8⁺ T细胞及CD4⁺ T细胞浸润增加。综上，SOAT1缺失可通过促进肿瘤反应性CD8⁺ T细胞浸润增强肝癌免疫治疗疗效。

单细胞RNA测序数据证实，肿瘤内在的SOAT1缺失可增强CD8⁺ T细胞和树突状细胞（DCs）的浸润，扰乱癌细胞和肿瘤募集免疫细胞中的脂质与胆固醇代谢，同时增强抗原呈递和免疫应答。HCC肿瘤组织及癌旁正常组织的多重免疫荧光染色分析数据显示，SOAT1表达与HCC中的胆固醇代谢和CD11b⁺ 髓系细胞浸润呈正相关，表明SOAT1在调节肿瘤免疫微环境中发挥作用（图3）。

图3 肿瘤内在的SOAT1缺失或药理学抑制，能增强T细胞介导的免疫监视作用和免疫治疗敏感性^[1]

脂质组学和胆固醇代谢组学分析显示，SOAT1缺失的细胞中游离胆固醇在ER中积聚，饱和脂肪酸升高、不饱和脂肪酸降低，提示脂肪酸代谢功能发生改变。研究者还发现，SOAT1缺失的肿瘤细胞在T细胞杀伤时的总抗氧化能力降低、脂质活性氧（ROS）选择性升高、还原型谷胱甘肽（GSH）与氧化型谷胱甘肽（GSSG）比值降低；加入抗氧化剂可逆转其敏感性，证明了氧化应激是关键机制。此外，回补核固醇调节元件结合蛋白2（nSREBP2）可恢复抗氧化能力和抗杀伤抵抗，提示胆固醇生物合成是支持氧化还原弹性的主导通路。

3. SOAT1缺失可在肥胖及免疫抑制条件下增强免疫治疗疗效

为进一步探究SOAT1缺失与肥胖及免疫治疗疗效的相关性，研究纳入了16例身体质量指数（BMI）≥28的肥胖HCC患者和16例BMI＜28的体重正常HCC患者进行对比分析。免疫荧光染色结果显示，肥胖患者肿瘤中SOAT1表达更高；生存分析显示，肥胖患者组的复发率更高、中位OS更短。免疫谱系分析显示，在高脂高胆固醇饮食诱导的肥胖小鼠模型中，SOAT1缺失的肿瘤细胞中CD4⁺ T细胞、巨噬细胞和DCs浸润增加，其形成的原位肿瘤表现出更高的脂质ROS水平，肿瘤生长显著受到抑制。特别是，SOAT1缺失与PD-1抑制剂联合治疗时几乎实现肿瘤完全消退。细胞共培养的实验结果显示，SOAT1缺失后，在经他克莫司处理和未处理两种条件下均对他克莫司耐药CAR-T介导的杀伤敏感，表明SOAT1缺失联合CAR-T治疗具有临床转化的潜力。综上，SOAT1缺失可阻断胆固醇酯化，能优先使肿瘤细胞敏感化，同时保留或增强T细胞功能，即使在免疫抑制条件下也能抑制肿瘤生长并增强免疫治疗效果（图4）。