1.研究通过采集接受紫杉醇和吉西他滨化疗的PDAC患者治疗前后的肿瘤活检组织和外周血，进行单细胞RNA测序。

2.为验证化疗耐药的生态位，同时采用多重免疫荧光、空间转录组（10x Visium HD，2μm高分辨率）的方法，再通过体外CRISPR-Cas9敲除等方法进行体内功能验证实验，聚焦CD276/B7-H3作为研究中的关键驱动因子。

3.在单细胞分辨率下揭示了化疗诱导的恶性细胞状态和免疫微环境的动态重塑。整合分析发现了一个化疗耐药生态位，由SNCG⁺基底样肿瘤细胞、SPP1⁺肿瘤相关巨噬细胞以及耗竭性T细胞组成，在无应答患者治疗期间，该生态位逐渐主导肿瘤微环境。

4.研究首次明确CD276/B7-H3是双重免疫检查点，是化疗的核心驱动因子，它促进肿瘤细胞向基底样耐药状态转变直接产生化疗抵抗，同时诱导T细胞耗竭，并增强肿瘤相关巨噬细胞的血管生成特征。