真菌微生物诊断通常包括分离培养和直接显微镜检，其灵敏度取决于样品类型和所使用的诊断技术。目前，几种诊断技术可用于检测侵袭性真菌感染（IFIs），主要基于真菌特异性生物标志物的识别，包括，括(1-3)-β-D葡聚糖（BDG）检测，又称为 G 试验、半乳甘露聚糖抗原试验（GM 试验）、抗原/抗体检测、侧向层析、免疫层析、甘露聚糖抗原/抗体检测以及核酸扩增试验（NAAT）等，具体检测方法的选择主要取决于疑似真菌病原体。

血培养是诊断侵 IC 的金标准，但血培养不敏感。生物标志物和 NAATs 尚未被常规推荐作为诊断侵袭性念珠菌病的独立工具。可用的生物标志物包括（1→3）-β- D -葡聚糖（BDG）、甘露聚糖抗原和抗甘露聚糖抗体（Mn/Ab Mn）、以及针对念珠菌细胞壁成分的念珠菌芽管特异性抗体（CAGTA）检测。

有几种商用 NAAT 平台可用于检测念珠菌。生物标志物与分子检测相结合的主要优势在于其能够提高 IC 的阴性预测值（NPV）。

IA 主要发生在有严重合并症的患者身上，包括中重度慢性阻塞性肺疾病（COPD）、失代偿期肝硬化、未控制的 HIV 感染以及实体瘤。其他危险因素还包括长期或大剂量使用皮质类固醇治疗、重症监护病房中的侵入性操作、长期使用抗生素以及近期或同时发生病毒感染。

有几种诊断工具可用于检测 IA，包括生物标记物，如 GM试验 （曲霉菌特异性）和 BDG（非特异性）。支气管肺泡灌洗液（BALF）样本聚合酶链式反应（PCR）可联合其他诊断方法，如胸部影像学、BALF 样本 GM 试验、BDG 试验、 PCR 检测、侧向层析法检测以及曲霉菌培养等，用于诊断 IA。

PJP 主要发生在具有潜在危险因素的患者中，如免疫抑制、长期皮质类固醇治疗、呼吸道合并症（如 COPD）、脓毒症、使用新型分子抑制剂、高龄和潜在的免疫缺陷（如 HIV 感染）。

PJP 的诊断金标准为合格下呼吸道标本经特殊染色后镜下检出肺孢子菌，但病原学染色法敏感度低，阴性结果无法排除 PJP。NAAT（主要是定量 RT-PCR）在诊断中发挥着越来越突出的作用。当对支气管肺泡灌洗样品进行检测时，NAAT 提供了接近100%的灵敏度和高阴性预测值（NPV），使其成为排除 PJP 感染有价值的工具。

PJP 患者血清 BDG 水平通常升高，但单凭 BDG 检测不足以明确排除该病。非侵入性标本，如鼻咽抽吸物和口腔冲洗液，现在通常用于 NAAT，特别是在检测前高度可疑的患者中。在这种情况下，联合使用 BDG 和 NAAT 可以支持 PJP 的诊断。但两项检测的阴性结果并不能明确排除 PJP 感染。

由于缺乏特异性生物标志物和可靠的非侵入性检测方法，毛霉病的诊断仍然存在挑战。血培养一般无法培养出毛霉目真菌（血培养阳性提示污染可能性大）。对活检组织进行组织病理学检查是毛霉病确诊的重要手段。目前，通过NAAT检测血清中的毛霉菌对于毛霉菌病的无创诊断越来越重要。血清毛霉菌 PCR 检测可以提供中等证据来确诊或排除毛霉菌病，并有助于确诊病例早期接受靶向抗真菌治疗，而且随访血清中毛霉菌 DNA负荷也可有助于治疗的管理 。

侵袭性真菌感染的诊断需要多种方法，从全面的临床病史和准确的预测概率评估开始。常规使用直接显微镜和培养仍然是必不可少的第一步诊断。了解当地流行情况、流行病学模式和个体危险因素是指导临床怀疑和检测选择的关键。在可能的情况下，结合不同的诊断测试可以显著提高灵敏度和总体诊断准确性。

参考资料：

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