2025年8月13日，复旦大学附属肿瘤医院研究团队发表于《Advanced Science》的一项研究，通过功能实验与多组学验证，首次揭示癌症相关成纤维细胞（CAFs）衍生因子CCT6A是胃癌进展的关键驱动因子，通过与β-catenin相互作用激活下游信号通路，调控肿瘤干细胞样特性、化疗耐药性和糖代谢，为胃癌诊断与治疗提供新靶点。

TCGA数据库、FUSCC队列的实时荧光定量逆转录PCR（RT-qPCR）与蛋白质印迹分析均一致显示，CCT6A在胃腺癌组织中的mRNA及蛋白水平均显著高于正常胃组织（p<0.001），且主要定位于CAFs而非肿瘤上皮细胞。在临床队列中，化疗耐药组（RPC，术后化疗复发患者）患者肿瘤组织内CCT6A阳性CAFs的富集程度及其血清CCT6A水平均显著高于化疗敏感组（non-RPC）（p<0.001）。这表明CCT6A阳性CAFs参与了胃癌化疗耐药的调控，可作为预测化疗应答的生物标志物及逆转耐药的潜在干预靶点。此外，对接受术前PET/CT成像患者的分析发现，CCT6A高表达肿瘤的病灶表现出显著更高的最大标准化摄取值（SUVmax），该相关性在癌上皮细胞（p=0.016）与CAFs（p=0.010）中均成立。此结果直接将CCT6A表达与胃癌增强的糖酵解活性相关联。生存分析显示，CCT6A阳性CAFs的高丰度与更短的总生存期（OS, p<0.001）和无病生存期（DFS, p=0.001）显著相关，且在复发或转移性亚组中此趋势依然存在。单因素及多因素Cox回归分析进一步证实，CCT6A阳性CAFs丰度是影响患者OS和DFS的独立预后因素，其预后价值独立于M分期与TNM分期。

Flag标签亲和纯化结合液相色谱-串联质谱联用技术（LC-MS/MS）分析表明，β-catenin是CCT6A关键相互作用伴侣。机制研究表明，CCT6A通过竞争性破坏β-catenin与GSK3β和AXIN1的相互作用，从而阻断其降解以稳定β-catenin。在HGC-27和MKN-45细胞中进行的功能获得与功能缺失实验进一步揭示，CCT6A可通过双重调控β-catenin的磷酸化状态，促进其稳定、核转位及转录活性，进而激活Wnt信号通路。

多组学分析发现c-Myc是该通路的关键下游效应因子，ChIP与荧光素酶报告基因实验证实CCT6A增强β-catenin与c-Myc启动子的结合。进一步鉴定出DDIT4和TXNIP为c-Myc的直接转录靶标。功能实验表明，CCT6A通过激活c-Myc转录活性，进而抑制DDIT4与TXNIP的启动子活性和蛋白表达，且β-catenin抑制剂XAV939可增强此过程。这些结果表明，CCT6A/β-catenin/c-Myc信号轴通过转录抑制DDIT4和TXNIP表达促进胃癌进展。

序列分析鉴定出与CCT6A高度同源的假基因CCT6P1，其在胃癌组织中与CCT6A同步显著上调，且两者表达呈正相关。同时，功能实验证实CCT6P1在mRNA和蛋白水平均正向调控CCT6A。机制上，CCT6P1作为分子海绵吸附miR-922，双荧光素酶报告基因和RNA免疫沉淀实验均证实了二者的直接结合。进一步研究发现miR-922同样靶向CCT6A的3'UTR，而CCT6P1过表达可竞争性解除miR-922对CCT6A的抑制。因此该研究确立了CCT6P1/miR-922/CCT6A轴在胃癌进展中的关键调控作用。

为阐明胃癌中CCT6P1和CCT6A过表达的转录调控机制，复旦大学附属肿瘤医院研究团队通过生物信息学分析在两个基因启动子区均鉴定出保守的c-Myc结合基序（CCACCTG/C）。功能实验证实c-Myc对这两个基因具有直接转录调控作用：c-Myc过表达可显著上调CCT6P1和CCT6A的表达水平，而其敲低则产生相反效应。进一步的机制验证通过荧光素酶报告基因实验显示，c-Myc仅能增强野生型启动子的转录活性，而对突变型结合位点的启动子无此效应。染色质免疫沉淀-qPCR实验直接证实c-Myc蛋白占据这两个基因启动子的预测结合位点。这些发现共同确立了c-Myc驱动的正反馈转录环路，该环路通过直接转录激活CCT6P1和CCT6A的表达，从而维持并放大胃癌中的致癌信号传导。

通过对比原代培养的CAFs与正常成纤维细胞（NFs），发现CAFs中CCT6A蛋白表达显著上调，且其表达水平与CAFs活化和增殖能力呈正相关。功能实验表明，在NFs中过表达CCT6A可促进其活化标志物（FAP、FSP1和α-SMA）表达并增强细胞增殖能力，而在CAFs中敲低CCT6A则产生相反效应。进一步研究揭示CCT6A对CAFs代谢重编程的重要作用。过表达CCT6A可显著增强NFs的糖酵解活性，表现为葡萄糖摄取、乳酸生成和ATP产量增加；而敲低CCT6A则抑制CAFs的糖酵解过程。

机制研究表明，CCT6A主要通过外泌体途径在细胞间传递。通过透射电镜、纳米颗粒追踪和蛋白质印迹验证了从CAFs中成功分离出细胞外囊泡。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测显示CAFs来源的外泌体中CCT6A含量显著高于NFs或胃癌细胞来源的外泌体。利用GW4869抑制剂和超速离心去除外泌体的实验证实，CAFs主要通过外泌体将CCT6A转运至胃癌细胞。蛋白酶保护实验进一步验证CCT6A主要存在于外泌体内部，而非游离于细胞外环境中。综上所述，这项研究阐明了CCT6A通过促进CAFs活化、增殖和糖酵解，并经由外泌体途径转移至胃癌细胞，从而在肿瘤微环境中发挥重要作用。

研究发现，CAF外泌体CCT6A可显著增强胃癌细胞的干细胞样特性，表现为肿瘤球形成能力增强；同时提高癌细胞对顺铂的耐药性，并促进糖酵解和氧化磷酸化代谢重编程。机制研究表明，抑制β-catenin可逆转CCT6A诱导的恶性表型，而过表达DDIT4与TXNIP则能部分拮抗其作用。体内实验显示，在CCT6A敲低的移植瘤中，联合使用β-catenin抑制剂XAV939或c-Myc抑制剂10058-F4可进一步抑制肿瘤生长。患者来源类器官（PDO）模型证实CCT6A敲低可抑制肿瘤形成，组织学分析表明干预该信号轴可下调Ki-67并上调DDIT4与TXNIP表达。本研究揭示了靶向CCT6A/β-catenin/c-Myc轴在胃癌治疗中的潜在价值。