医脉通编译整理，未经授权请勿转载
随着分子生物学的研究进展，人们逐渐理解基因突变对结
结直肠癌分子检测的基本要求
1. 对不可切除晚期或复发性CRC患者进行抗EGFR单克隆抗体治疗之前，推荐进行RAS（KRAS/NRAS）突变检测（强烈推荐）。
几个随机临床研究表明，抗EGFR单克隆抗体治疗不能使KRAS外显子2、3、4和NRAS外显子2、3、4突变患者获益。这也在大规模META分析中得到证实，不论抗EGFR单克隆抗体类型（
2. 推荐经认证的有效方法如体外诊断对肿瘤组织样本进行RAS突变检测（强烈推荐）。
检测RAS突变的方法包括：(i)PCR为基础的特异性检测技术，如等位基因特异性PCR和PCR-rSSO；(ii)扩增靶基因再直接测序
3. 晚期或复发性CRC患者一线治疗之前，推荐进行BRAF V600E突变检测（推荐）。
BRAF V600E突变是CRC患者预后不良的独立预测指标。最近有研究报道，三联化疗（FOLFOXIRI）
4. 对肿瘤组织样本直接进行测序（结合手工显微解剖）或使用PCR为基础的方法检测BRAF V600E突变（推荐）。
在以往的研究中，直接测序的突变检出限为10%-25%。其他方法的突变检出限为1% - 10%。考虑到这些不同的检测方法对该预后不良指标显示一致性结果，建议检测BRAF V600E突变的检出限为1%～10%。
5. 对疑似Lynch综合征的CRC患者的肿瘤组织样本进行DNA错配修复（MMR）缺陷检测（强烈推荐）。
Lynch综合征是由MLH1、MSH2、MSH6和PMS2的胚系系突变引起的常
6. 微卫星不稳定检测和MMR蛋白免疫组化检测推荐用于肿瘤MMR缺陷检测（强烈推荐）。
通过评估不同长度微随体（由微卫星区异常重复引起）是否存在（MSI检测）或测定MMR蛋白是否缺失（IHC）确定肿瘤中MMR蛋白功能。高水平或高频率MSI（MSI-H）或MMR蛋白缺失认为是MMR缺陷（dMMR），而低频率MSI（MSI-L）、微卫星稳定（MSS）或MMR蛋白表达阳性被认为是功能完善的MMR（pMMR）。
7. 对于进行过根治性切除术的II期结直肠癌患者，推荐对其肿瘤组织样本进行MMR缺陷检测（推荐）。
基于比较单纯手术与术后5-FU治疗的III期META分析，目前认为dMMR是II期/III期
8. 在不可切除晚期或复发性CRC患者进行一线治疗之前，对其肿瘤组织样本进行MMR缺陷检测（专家共识意见）。
有研究显示，在野生型BRAF V600E患者中，与pMMR患者相比，dMMR不可切除晚期或复发性CRC患者具有较差的生存率。因此，当开始一线治疗时，MMR缺陷检测联合BRAF V600E突变检测可以用来预测预后。抗PD-1抗体在dMMR不可切除晚期或复发性CRC患者中显示出较好的疗效，FDA于2017年批准pembrolizumab和nivolumab用于这些患者。
9. 推荐体细胞基因检测使用福尔马林固定、石蜡包埋组织块；确认未染色、薄切片含有足够数量的肿瘤细胞，并采用配对HE染色（强烈推荐）。
10. 应在质量保证体系下进行CRC基因检测（强烈推荐）。
实施各基因检测的时间和种类
参考文献：
Kentaro Yamazaki,et al.Japanese Society of Medical Oncology Clinical Guidelines:Molecular Testing for Colorectal Cancer Treatment, Third Edition.2018 Jun;109(6):2074-2079.
(本网站所有内容，凡注明来源为“医脉通”，版权均归医脉通所有，未经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，否则将追究法律责任，授权转载时须注明“来源：医脉通”。本网注明来源为其他媒体的内容为转载，转载仅作观点分享，版权归原作者所有，如有侵犯版权，请及时联系我们。)
