BRAF抑制剂达拉非尼联合MEK抑制剂曲美替尼（D+T）是晚期BRAF V600E突变NSCLC的标准一线（1L）治疗方案。迄今为止，液体活检在预测晚期BRAF V600E突变NSCLC患者接受一线D+T治疗结局中的作用尚未得到评估。

在意大利25家中心开展了一项前瞻性多中心研究，旨在探讨液体活检在接受一线D+T治疗的晚期BRAF V600E突变NSCLC患者中的作用。在治疗开始前（t0）、治疗4周后（t1）、治疗前16周每4周一次以及之后每8周一次时收集血浆样本，直至疾病进展（PD）。采用数字微滴PCR（ddPCR）检测血浆样本中的BRAF V600E突变。在t0和PD时间点对血浆样本进行下一代测序（NGS）分析。

研究纳入了40例接受一线D+T治疗的BRAF V600E突变NSCLC患者。总体而言，24例（60%）患者为男性，中位年龄为71岁[四分位距（IQR）,65-77]，28例（70%）患者有吸烟史。

D+T治疗的总缓解率（ORR）为43%（95%CI：27-58），疾病控制率（DCR）为70%（95%CI：56-84）。

中位随访17.8个月（95%CI：14.0-21.8）后，24例（60%）患者出现进展，18例（45%）患者死亡。中位无进展生存期（mPFS）为8.3个月（95%CI：4.4-NR），中位总生存期（mOS）为21.1个月（95%CI：8.6-NR）。

t0时点的ddPCR分析显示，在39例可评估患者中，有24例（62%）患者的循环肿瘤DNA（ctDNA）中BRAF V600E呈阳性（ctDNA阳性患者/脱落者），其中位变异等位基因频率（AF）为1.1%（IQR：0.6-5.2）。

NGS分析显示，在39例可评估患者中，26例（67%）在基线时（t0）检测到ctDNA脱落（ctDNA阳性）。在t0时点的NGS分析中，26例ctDNA阳性患者中有19例（73%）检测到共突变，其中TP53突变最为常见（14/26,54%）。

在t1时可评估BRAF V600E清除状态的基线ctDNA阳性患者中（n=21），17例（81%）实现了BRAF V600E清除。在PD时点，20例可评估患者中有11例（55%）在ctDNA中检测到BRAF V600E，其中8例患者的AF有所升高。在发生生物学PD的患者中（n=10），所有患者均出现影像学/临床PD，发生的中位间隔时间为4.9周（IQR1.4-9.8）。所有患者在PD时均检出共突变，潜在的耐药机制包括NRAS、KRAS、TP53突变以及MET、EGFR和ERBB2的拷贝数变异（CNV）。

在基线ctDNA阳性患者中，较高的BRAF V600E AF与较短的PFS和OS相关：连续变量Cox回归分析显示，PFS风险比（HR）为1.09（95%CI：1.02-1.17，p=0.013），OS HR为1.10（95%CI：1.02-1.18，p=0.010）。

基线EGFR扩增和MET扩增与较差的PFS（3.4 vs 10.3个月，p<0.001；3.4 vs 10.3个月，p=0.018）和OS（3.4 vs NR个月，p<0.001；3.7 vs NR个月，p=0.009）相关。

在t1时点实现BRAF V600E清除与更优的PFS（8.3 vs. 1.4个月，p<0.001）和OS（10.5 vs. 2.2个月，p<0.001）相关。

液体活检或可成为预测晚期BRAF V600E突变型NSCLC患者接受1L D+T治疗疗效的有效工具。ctDNA脱落的动态变化为治疗反应提供了潜在的早期生物标志物。