作者：中国医学科学院皮肤病研究所 陈燕清翻译，王洪生审校

【据《Acta Derm Venereol》，2018年11月报道】题：T-SPOT.TB在皮肤分枝杆菌感染中诊断价值研究（作者Chen Y等）

γ干扰素释放实验是一种常用于潜伏结核诊断的检测方法，它以多数环境分枝杆菌及BCG分枝杆菌缺失的RD1区编码抗原（ESAT-6，CFP-10）为底物，相对于结核菌素皮肤实验更具特异性。然而相同抗原的编码序列和氨基酸序列在海鱼分枝杆菌、苏尔佳分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌及结核分枝杆菌之间具有同源性，对于多种非结核分枝杆菌（NTM）感染亦有辅助诊断价值。本研究前瞻性研究了一种代表性的γ干扰素释放实验T-SPOT.TB的在结核等含RD1区分枝杆菌皮肤感染中的诊断价值，并评估在抗菌治疗前后该实验结果的变化情况。

我们于2015年6月1日及2017年12月30日间，在中国医学科学院皮肤病医院收治患者中进行了该项研究。纳入标准包括：（1）慢性皮损；（2）病理提示感染性肉芽肿；（3）培养阳性菌落或组织标本经分子生物学方法确认为分枝杆菌感染，并排除了有活动性内脏结核、有抗结核治疗史、病理不符合以及拒绝参与研究的患者。实验前收集患者的外周静脉血行T-SPOT.TB实验，对含RD1区分枝杆菌皮肤感染的患者每2月进行一次随访，并在抗菌治疗6月后再次进行T-SPOT.TB检测。皮肤结核患者的治疗方案遵照WHO指南推荐（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酰胺强化治疗2月，异烟肼、利福平维持治疗4月），NTM治疗参照药物敏感性实验结果或经验性地选用抗菌药物治疗。

T-SPOT.TB实验操作流程遵照试剂盒说明书标准，将A孔与B孔斑点数分别与阴性对照孔斑点数相减得到斑点形成细胞数量（SFCs）。分子生物学方法以PCR为基础，对16S rRNA、hsp65编码序列测序后进行同源性比较以鉴定菌株。

对连续性变量中正态分布者以均值（标准差）描述，非正态分布者以均值（四分位距）描述；组间年龄差异以曼-惠特尼U检验评价；性别，基础状况、外伤史及HIV感染情况使用卡方检验。组间阳性率使用卡方检验，中为斑点形成细胞数量Kruskal-Wallis单因子方差分析进行比较。治疗前后实验阳性率及斑点数由分别由麦克尼马尔检验、秩和检验进行比较。以P值＜0.05为有效性标准，数据分析均由IBMSPSS 19.0完成。

64例符合研究标准的临床疑似病例中，46（71.9%）例病例为含 RD1 区分枝杆菌皮肤感染，8(12.5%)例为含 RD1区 NTM感染，10(15.6%)例为皮肤真菌感染。结果显示，T-SPOT.TB在含 RD1区 分枝杆菌皮肤感染病例中阳性率（87.0%）远高于其他感染组（0%，p=0.000）。在皮肤结核感染病例中灵敏度为95.8%，其他含 RD1区 NTM感染灵敏度为72.7%。T-SPOT.TB在含RD1区分枝杆菌皮肤感染中的诊断表现如图1。T-SPOT.TB的中位SFCs在皮肤结核、含RD1区NTM 皮肤感染及皮肤真菌感染的患者中分别为23.5%， 14.0% 和0.0%（P=0.000）。42例完成随访的病例中，皮肤结核、含RD1区NTM 皮肤感染T-SPOT.TB阳性率分别下降至59.1% （P= 0.008）及45.0%（P=0.031）。

研究表明T-SPOT.TB在皮肤结核感染及含RD1区NTM 皮肤感染中呈阳性，可借之与其他感染鉴别;大部分患者经治疗后SFCs值下降，可作为评估预后的指标。我们建议在使用γ 干扰素释放试验诊断潜伏结核前应排除皮肤结核或海鱼分枝杆菌等含RD1区NTM感染，尤其在东亚沿海地区等含RD1区NTM高流行地区。

这项研究受到样本量的限制，分枝杆菌感染菌种鉴定受当前诊断条件所限，堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌及苏尔加分枝杆菌感染病例较少，因此T-SPOT.TB在所有含RD1区NTM感染中的诊断价值尚需进一步的研究。

图1 分枝杆菌皮肤感染图与T-SPOT.TB在皮肤不同分枝杆菌感染的比较. a-c) 分别为皮肤结核、海鱼分枝杆菌皮肤感染、楚尔盖分枝杆菌皮肤感染；d）T-SPOT.TB的SFC值在不同类型分枝杆菌皮肤感染；e）含RD1的分枝杆菌皮肤感染治疗前后T-SPOT.TB结果比较.

来源：医学参考报皮肤病与性病学频道