肺动脉高压（PAH）是以肺血管内皮细胞（EC）功能障碍和失调为特征的疾病，导致炎症反应、异常血管修复及高死亡率。内皮抑素（ES）作为血管生成强效抑制剂，既往研究发现其与PAH患者不良预后、血流动力学恶化及高死亡率相关。然而ES影响PAH预后的完整分子机制尚未明确。本研究提出假说：ES水平可改变人原代肺微血管内皮细胞（HMVEC-Ls）中多种microRNA（miR）-mRNA通路表达。

通过批量RNA测序技术，比较ES处理（6小时与24小时）与对照组的HMVEC-Ls，筛选差异表达的miR及mRNA。差异表达基因（DEG）定义为绝对倍数变化≥1.4且校正P值（q值）<0.05。利用京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析（ShinyGo 0.77）解析ES依赖性miR的潜在靶基因通路。

非偏倚分析鉴定出10个在双时间点均被ES上调的miRNA。ES-miR依赖性DEG的通路富集显示，TGF-β信号通路富集倍数最高（涉及8个基因，FDR=8.6×10⁻⁶）。该通路中关键差异基因包括：BAMBI、BMPR2、SMAD6、ID1和ID4。值得注意的是，上调miR之一的miR-18a-5p（miR17-92a家族成员及内源调控因子）已被证实可调控TGF-β通路关键分子（如BMPR2）。

miRNA、差异表达基因（DEG）及TGF-β/BMPR2信号通路参与肺动脉高压（PAH）发病的假说性机制示意图

ES通过改变HMVEC-Ls中miRNA-mRNA调控网络，显著影响TGF-β信号轴。miR-18a-5p及其TGF-β靶基因的失调可能是ES参与PAH发病的关键机制。针对此miRNA依赖性通路的深入研究，将为PAH新型治疗策略提供理论依据。